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BlueBlock PF - Protein-freies, Polymer-basiertes Blockierungs-Reagenz für Western Blotting-Experimente


SERVA Electrophoresis GmbH
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P_2018_04_07_002a


Um ein gutes Signal-zu-Hintergrund-Verhältnis zu erreichen, ist es wichtig, auf der Transfermembran unspezifische Antikörper-Bindungsstellen zu blockieren. Bei Protein-enthaltenden Blockierungs-Lösungen, wie Magermilchpulver oder BSA, besteht die Gefahr, dass nicht nur unspezifische Antikörper-Bindungsstellen blockiert, sondern auch spezifische Bindungsstellen maskiert werden. Mit BlueBlock PF werden nur die unspezifischen Bindungen unterdrückt, während die spezifischen Bindungsstellen erhalten bleiben, womit die Signalstärke deutlich erhöht wird.

Im Überblick

  • Verstärkte Signalintensität im Vergleich zu Protein-basierten Blockierungsreagenzien
  • Geeignet für kolorimetrische und Chemilumineszenz-Detektionssysteme
  • 10x Konzentrat
  • Basiert auf Phosphatpuffer
  • Enthält kein Natriumazid

Anwendung im Western Blot:

  • Das 10x-Konzentrat wird mit dest. Wasser auf 1x verdünnt.
  • Die Blockierung erfolgt durch Inkubation der Membran mit 1x-Blockierungsreagenz bei RT auf einem Schüttler für mindestens 45 Minuten oder über Nacht.
  • Zur 1. Antikörper-Inkubation wird der primäre Antikörper in 1x BlueBlock PF verdünnt und für 1 Stunde bei Raumtemperatur auf einem Schüttler gemeinsam mit den an der Membran gebundenen Zielproteinen inkubiert. Anschließend wird der Blot dreimal für 5 Minuten bei Raumtemperatur in PBS-T oder TBS-T gewaschen.
  • Für die 2. Antikörper-Inkubation wird der sekundäre Antikörper in 1x BlueBlock PF verdünnt und ebenfalls für 1 Stunde bei Raumtemperatur auf einem Schüttler gemeinsam mit dem Blot inkubiert. Nach anschließendem dreimaligem Waschen für 5 Minuten in PBS-T oder TBS-T erfolgt die Detektion je nach Substrat.


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Letzte Änderungen: 07.04.2018


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